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HPLC峰型不佳原因
  • 發(fā)布日期:2021-08-09      瀏覽次數(shù):4306
    •                                                                        HPLC峰型不佳原因

                                                                         檢碩科學(xué)上海有限公司

      1. 未出峰    可能的原因:

      a. 未成功進(jìn)樣,或樣品未溶解進(jìn)溶劑中,或樣品分解變質(zhì)或樣品濃度太低;

      b. 液相色譜儀器本身的問題:泵或者檢測器故障;

      c. 流動(dòng)相選擇不合適,如對于反相硅膠柱來說,若流動(dòng)相極性太大,是沖不下來一些小極性的物質(zhì)的,物質(zhì)一直保留在柱子中,因而不出峰;

      d. 檢測器不合適,如有些產(chǎn)品沒有紫外吸收或者吸收很弱,但是檢測還使用了UV檢測器;

      2.平頭峰     可能的原因:

      a. 樣品濃度過大或進(jìn)樣體積太大,這個(gè)也是大多數(shù)原因;

      b. 液相色譜儀檢測器設(shè)置不正確;

      3.負(fù)峰     可能的原因:

      a. 流動(dòng)相吸收本底值過高;

      b. 進(jìn)樣過程中進(jìn)入空氣;

      c. 樣品組分的吸收低于流動(dòng)相;

      d. 配制樣品的溶劑與流動(dòng)相不一致;

      4.肩峰     可能的原因:

      a. 進(jìn)樣量過大,樣品濃度過高;

      b. 保護(hù)柱或色譜柱柱頭堵塞;

      c. 保護(hù)拄或色譜柱污染或失效;

      d. 色譜柱柱頭塌陷;

      5.裂峰     可能的原因:

      a. 溶劑效應(yīng):溶解樣品用的溶劑和起始流動(dòng)相極性相差太大;

      b. 保護(hù)柱或色譜柱柱頭堵塞;

      c. 保護(hù)拄或色譜柱污染或失效;

      d. 色譜柱柱頭塌陷;

      6.鬼峰     可能的原因:

      鬼峰(ghost peak)是在某個(gè)譜圖里出現(xiàn),可能同樣的條件再做一次又不出現(xiàn)了,時(shí)有時(shí)無的峰。

      a. 進(jìn)樣閥殘余峰,在每次進(jìn)完樣后用充足的時(shí)間來平衡和清洗系統(tǒng);

      b. 樣品中存在未知物,改進(jìn)樣品的預(yù)處理;

      c. 流動(dòng)相污染,更換新流動(dòng)相(或者換品牌);盡可能現(xiàn)配現(xiàn)用,隔夜的流動(dòng)相再次使用時(shí)要過濾;

      d. 流路中有小的氣泡,打開Purge閥,加大流速排除;

      7. 前伸峰     可能的原因:

      a. 進(jìn)樣量或樣品濃度高;

      b. 溶解樣品的溶劑比流動(dòng)相極性強(qiáng);

      c. 保護(hù)拄或色譜柱污染或失效;

      d. 流動(dòng)相不合適,更換新流動(dòng)相(調(diào)pH或換種類、比例等);

      8. 拖尾峰     可能的原因:

      a. 進(jìn)樣量或樣品濃度高;

      b. 流動(dòng)相不合適,更換新流動(dòng)相(調(diào)pH或換種類、比例等);

      c. 硅羥基作用:加入三乙胺,用堿致鈍化柱增加緩沖液或鹽的濃度降低流動(dòng)相pH值,鈍化樣品;

      d. 柱內(nèi)燒結(jié)不銹鋼失效:更換燒結(jié)不銹鋼,加在線過濾器,過濾樣品;

      e. 色譜柱柱頭塌陷或柱效下降:更換色譜柱;

                                                                                                                                           本篇轉(zhuǎn)載至實(shí)驗(yàn)之家

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